平面偏振光通過(guò)具有旋光活性的介質(zhì)時(shí)，由于介質(zhì)中同一種旋光活性分子存在手性不同的兩種構(gòu)型，它們對(duì)平面偏振光所分解成的右旋和左旋圓偏振光吸收不同，出射時(shí)電場(chǎng)矢量的振幅不同，再次合成的偏振光不是圓偏振光，而是橢圓偏振光，從而產(chǎn)生圓二色性。

圓二色譜儀是用于推斷非對(duì)稱分子的構(gòu)型和構(gòu)象的一種旋光光譜。光學(xué)活性物質(zhì)對(duì)組成平面偏振光的左旋和右旋圓偏振光的吸收系數(shù)(ε)是不相等的，εL≠εR，即具有圓二色性。如果以不同波長(zhǎng)的平面偏振光的波長(zhǎng)λ為橫坐標(biāo)，以吸收系數(shù)之差Δε=εL-εR為縱坐標(biāo)作圖，得到的圖譜即是圓二色光譜，簡(jiǎn)稱CD。如果某手性化合物在紫外可見區(qū)域有吸收，就可以得到具有特征的圓二色光譜。由于εL≠εR，透射光不再是平面偏振光，而是橢圓偏振光，摩爾橢圓度[θ]與Δε的關(guān)系為：[θ]=3300Δε。圓二色譜也可以摩爾橢圓度為縱坐標(biāo)，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)作圖。由于△ε有正值和負(fù)值之分，所以圓二色譜也有呈峰的正性圓二色譜和呈谷的負(fù)性圓二色譜。在紫外可見光區(qū)域測(cè)定圓二色譜與旋光譜，其目的是推斷有機(jī)化合物的構(gòu)型和構(gòu)象。

樣品要求

1、樣品必須保持一定的純度不含光吸收的雜質(zhì)，溶劑必須在測(cè)定波長(zhǎng)沒(méi)有吸收干擾;樣品能完全溶解在溶劑中, 形成均一透明的溶液。

2、氮?dú)饬髁康目刂?/span>

3、緩沖液、溶劑要求與池子選擇：緩沖液和溶劑在配制溶液前要做單獨(dú)的檢查，看是否在測(cè)定波長(zhǎng)范圍內(nèi)有吸收干擾， 看是否形成沉淀和膠狀；在蛋白質(zhì)測(cè)量中，經(jīng)常選擇透明性極好的磷酸鹽作為緩沖體系。

4 樣品濃度與池子選擇

樣品不同，測(cè)定的圓二色光譜范圍不同，對(duì)池子大小 ( 光徑 ) 的選擇和濃度的要求也不一樣。蛋白質(zhì)CD光譜測(cè)量一般在相對(duì)較稀的溶液中進(jìn)行。