薄層色譜，與其他色譜技術(shù)的原理一樣，是一種利用混合物中各組分在某一物質(zhì)中的吸附或溶解性能的不同，或和其它親和作用性能的差異，各組成成分的不同物理特性使混合物的溶液流經(jīng)該種物質(zhì)，進(jìn)行反復(fù)的吸附或分配等作用，從而將各組份分開的技術(shù)。這些物理特性包括分子的大小、形狀、所帶電荷、揮發(fā)性、溶解性及吸附性等。薄層色譜分離一般是由幾種分離機(jī)理綜合的結(jié)果，最多的是吸附和分配，也有離子交換或凝膠滲透。薄色譜法的基本原理是鑒于在薄層色譜的過程中，固定相和流動(dòng)相的特性因分離原理的不同而差別較大，因此，為了方便敘述，現(xiàn)分別將各類型的色譜基本原理以及相關(guān)固定相和流動(dòng)相的技術(shù)要求簡要介紹如下。

一、吸附色譜的原理

吸附色譜法溶解于一相中的混合物的單一組分在另一相界面上會呈現(xiàn)出濃度變化，另一相表面常常出現(xiàn)組分的濃縮，這種現(xiàn)象稱之為吸附。吸附性薄層色譜法是將吸附劑在光潔的表面，如玻璃、金屬或塑料等表面上均勻地鋪成薄層，而后在上面點(diǎn)上樣品，以流動(dòng)相展開，這樣，組分不斷地被吸附劑吸附，又被流動(dòng)相溶解，解吸而向前移動(dòng)。由于吸附劑對不同組分有不同的吸附能力，流動(dòng)相也有不同的解吸能力，與吸附劑結(jié)合較緊密的組分較難被展開劑解吸，而與吸附劑結(jié)合較松散的組分則較容易被展開劑解吸。因此在流動(dòng)相向前流動(dòng)的過程中，不同組分移動(dòng)距離不同，原有的混合物就可以得到分離。分離度一般用比移值Rf值來表示，其數(shù)值可以通過被分離組分斑點(diǎn)中心離原點(diǎn)的距離與展開劑前沿離原點(diǎn)。

二、吸附色譜中對流動(dòng)相的要求

流動(dòng)相的選擇必須根據(jù)被分離物質(zhì)與所選用的吸附劑性質(zhì)這兩者結(jié)合起來加以考慮。在用極性吸附劑進(jìn)行色譜分離時(shí)，當(dāng)被分離物質(zhì)為弱極性物質(zhì)時(shí)，一般選用弱極性溶劑為展開劑；被分離物質(zhì)為強(qiáng)極性成分時(shí)，則需選用極性溶劑為流動(dòng)相。如果對某一極性物質(zhì)使用吸附性較弱的吸附劑（如以硅藻土或滑石粉代替硅膠），則流動(dòng)相的極性亦必須相應(yīng)降低。

在薄層色譜中，當(dāng)吸附劑活度為一定值時(shí)（如Ⅱ級或Ⅲ級），對多組分的樣品能否獲得滿意的分離，決定于展開劑的選擇。而展開劑的選擇原則主要還是根據(jù)被分離物質(zhì)的極性選擇相應(yīng)極性的展開劑。

膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜是一種基于膠束增溶和電泳移動(dòng)的新型色譜。當(dāng)樣品進(jìn)入毛細(xì)管后，在水相和膠束相中進(jìn)行分配，在水相中分配較多的組分移動(dòng)速度快，在膠束相中分配較多的組分移動(dòng)速度慢。因此，各種組分可以根據(jù)它們在兩相中分配不同而得到分離。膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜的特點(diǎn)在于它彌補(bǔ)了普通電泳法不能分離中性化合物的不足，可用于許多電中性藥物的分離測定。

三、反相薄層色譜法

反相薄層色譜是利用化學(xué)鍵合反應(yīng)，將烴基硅烷鍵合到硅膠表面，制成非極性固定相，本法可用于極性、極性化合物的分離，甚至水溶性化合物的分離。并可按理論和預(yù)期方法選用溶劑系統(tǒng)，因?yàn)镽f值與流動(dòng)相中的有機(jī)改性劑含量之間呈線性關(guān)系。本法回收率高，重現(xiàn)性好，薄板可重復(fù)使用。

四、薄層色譜法分類

1、板色譜

板薄層色譜是在被洗滌干凈的玻璃板（10×3cm左右）/硅膠板/鋁板上均勻的涂一層吸附劑或支持劑，待干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點(diǎn)線上，晾干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。

待展開劑前沿離頂端約1cm附近時(shí)，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。

2、棒色譜

棒狀薄層色譜是采用棒狀薄層分離技術(shù)與氫火焰離子化檢測（TLC/FID）手段組合而成的專用分析儀器，可檢測幾乎所有的有機(jī)化合物，特別適用于脂類、重油類分析，示蹤有機(jī)合成反應(yīng)過程。如潤揚(yáng)RY-CF19全自動(dòng)型是在CF19基礎(chǔ)上吸收國內(nèi)外薄層色譜技術(shù)，采用全自動(dòng)組分展樣系統(tǒng)替代手動(dòng)展樣工作臺，經(jīng)過多年的不斷完善和發(fā)展新近推出的一款可國產(chǎn)替代的棒薄層色譜儀?？稍陂_放的氣氛下檢測用氣相色譜和液相色譜方法很難檢測的樣品，并以非常簡單的對于點(diǎn)在色譜棒上的樣品通過全自動(dòng)組分展樣儀（全自動(dòng)展樣分析系統(tǒng)）分離后進(jìn)行FID的定量分析。